
Прееклампсията е потенциално застрашаващо състояние при бременните. Представлява мултисистемно разстройство, кoeто обикновено се проявява с хипертония>140/90 mmHg и протеинурия > 300 mg/24h. Има риск от сериозни усложнения и увреди както за майката, така и за плода. Прееклампсията е прогресивно и непредсказуемо заболяване, което отшумява единствено при раждане.
Сравнително често срещано състояние, засягащо до 8% от бременностите. Прееклампсидните състояния представляват 1 от 3 случая на тежка морбидност в акушерството. Може да се появи по всяко време след 20-та гестационна седмица. Най-често се диагностицира след 32-та седмица от бременността. Ранното развитие на заболяването (20-32 седмица) се свързва с особено големи рискове за майката и плода. Клиничната цел е да се даде възможност на плода да се развие, като едновременно се контролира симптоматиката при майката. Поради сериозност и непредсказуемост на нейното развитие са необходими обективни индикатори за скрининг и индентификация на застрашените от развитие на прееклампсия. Съвременната медицина дефинира sFlt-1 и PlGF, като надеждни диагностични предиктори за прееклампсия.
Физиологични функции на sFlt-1 и PlGF
sFlt-1 - Разтворимата fms-подобна тирозин киназа е антагонист на действието на съдовия ендотелен растежен фактор (VEGF) и плацентарния растежен фактор (PlGF). Блокира взаимодействието им с ендотелните рецептори на клетъчната повърхност.
VEGF – Съдовият ендотелен растежен фактор:
- участва в регулацията на кръвното налягане
- понижава съдовите тонове и по този начин може да намали кръвното налягане
- подпомага ангиогенезата
- поддържа целостта на гломерулната филтрационна бариера в бъбреците
PlGF – Плацентарният растежен фактор е гликопротеин, необходим за нормалното функциониране на ендотелните клетки.
Прекомерното производство на sFlt-1 в плацентата се смята за причина за хипертензията и протеинурията, откривани при пациенти с прееклампсия.
Съвременна концепция за патофизиологията на прееклампсия
Балансът между sFlt-1 и PIGF има съществена роля в патогенезиса на прееклампсията:
- Повишение на sFlt-1 се среща ~ 5-6 седмица преди началото на клиничните симптоми на прееклампсия.
- Занижени нива на PIGF се наблюдават преди 20 гестационна седмица при жени, които впоследствие развиват прееклампсия.
Ето защо определяне нивата на sFlt-1 и PlGF е въведено като помощно средство за идентификация на бременни с риск от прееклампсия.
Отговаряйки на нуждите за майчиното здравеопазване, като лидер в медицинската диагностика, Roche Diagnostics предлага на медиците по света диагностичен пакет от два теста за стратификация на риска от развитие на прееклампсия и нежалания изход от бременността:
Технически характеристики на sFlt-1 в системите Elecsys и платформите cobas e
1. Биохимизъм на sFlt-1:
(Анти)-ангиогенната молекула sFlt-1, също позната като VEGF R1 е член на семейството рецептори на съдово-ендотелния растежен фактор (VEGF). Първоначално е открита в плацентата, но се експресира и в сърцето, белите дробове и други тъкани.
Алтернативното свързване на първичната транскрипция на човешкия VEGF R1 води до две изоформи на Flt-1/VEGF R1. Двете преобладаващи форми са:
- мембранно свързаният рецептор с пълна дължина, който е способен на сигнална трансдукция
- късия, разтворим рецептор, който може да свързва лигандите си, но пречи на сигналната трансдукция.
В активната си форма VEGF R1 / Flt-1 образува хомодимери, но може да образува и хетеродимери с VEGF R2.
2. sFlt-1 и прееклампсия:
- Според редица експерти прееклампсията се предизвиква от дисбаланс в циркулиращите ангиогенни фактори
- PlGF (плацентарният растежен фактор) се свързва с голям афинитет с домейн 2 на VEGF рецептор 1
- При пациенти с прееклампсия, повишените нива на sFlt-1 / sVEGF R1 се свързват с намален свободен VEGF и PlGF
- В резултат свръхекспресия на sFlt-1 са наблюдавани клинични промени, свързани с прееклампсия при плъхове
3. Elecsys sFlt-1 – обща информация:
- Измерването на sFlt-1 е помощно средство при диагностика на заболяването прееклампсия, в комбинация с измерването на PlGF и други клинични и лабораторни показатели.
4. Elecsys sFlt-1 - технически и функционални характеристики:
Обща продължителност |
18 минути |
Принцип на теста |
Сандвичев принцип |
Sample Volume |
20 µl |
Аналитична чувствителност |
Приблиз. 6 pg/ml |
Функционална чувствителност |
Приблиз. 15 pg/ml |
Обхват на измерване |
6 – 85000 pg/ml |
Проследяемост |
Quantikine човешки разтворим VEGF-R1/Flt-1, тест с микроплака от R&D Systems |
Обща прецизност |
E2010/e411:CV% 4.3 – 2.3 (63 - 79101 pg/ml) E 170/e601: CV% 3.9 – 2.5 (66 – 78677 pg/ml) |
Материал за пробата |
Серум |
Годност на реактивите |
неотворени, при 2 – 8°C до изтичане на посочения срок на годност |
Годност след зареждане |
6 седмици във всички анализатори |
Разреждане |
Обикновено не е е необходимо, поради големия измервателен обхват |
Технически характеристики на PlGFв системите Elecsys и платформите cobas e
1. Биохимизъм на PlGF:
Ангиогенната молекула плaцентарен растежен фактор (PlGF) е член от семейството на васкуларния ендотелен растежен фактор (VEGF). Открит е за пръв път в плацентата, но се експресира и в сърцето, белите дробове и други тъкани.
Алтернативното свързване на първичната транскрипция на човешкия PlGF води до четири изоформи на PlGF (PlGF-1, -2, -3 и -4). Двете преобладаващи форми са PlGF-1 и PlGF-2. Различават се само по инсерцията на високопървичната 21-аминокиселинна последователност в карбоксилния край на PlGF-1. Този допълнителна последователност на PlGF-2 може да се свързва с хепарин и може да доведе до увеличено асоцииране с клетъчните мембрани.
PlGF се състои от два идентични мономера. Хомодимерът е ковалентно свързан с две вътреверижни дисулфидни връзки. Гликолизиран е, има молекулна маса от приблиз. 46 000.
PlGF се свързва с голям афинитет с домейн 2 на VEGF рецептор тирозин киназа, VEGFR-1 (= fms-подобна тирозин киназа, Flt-1). Рецепторът се състои от седем имуноглобулин подобни домейна във външноклетъчната си част, единичен трансмембранен регион и вътреклетъчен домейн тирозин киназа.
Външноклетъчната част на рецептора (= sFlt-1) съществува като алтернативно свързана и съкратена форма на Flt-1, която в серума може да се открие свободна. sFlt-1 също свързва VEGF и PlGF с голям афинитет. Може да намали свързването на двата растежни фактора с техния мембранно-свързващ рецептор.
2. PlGF и прееклампсия:
- Според редица експерти прееклампсията се предизвиква от дисбаланс в циркулиращите ангиогенни фактори
- При пациенти с прееклампсия, повишените нива на sFlt-1 се свързват с намален свободен VEGF и PlGF
3. Elecsys PlGF - технически и функционални характеристики:
Обща продължителност |
18 минути |
Принцип на теста |
Сандвичев принцип |
Sample Volume |
50 µL |
Аналитична чувствителност |
<2pg/mL |
Функционална чувствителност |
<10 pg/mL |
Обхват на измерване |
2 – 10 000 pg/mL |
Проследяемост |
Quantikine PlGF, тест с микроплака от R&D Systems |
Обща прецизност |
E2010/e411: CV% 3.6 – 4.1 % (100-4500 pg/mL) E170/e601: CV% 2.0 – 2.7 % (100-4500 pg/mL ) |
Материал за пробата |
Серум |
Годност на реактивите |
неотворени, при 2 – 8°C до изтичане на посочения срок на годност |
Годност след зареждане |
6 седмици във всички анализатори |
Разреждане |
Обикновено не е е необходимо, поради големия измервателен обхват |
Съотношението sFlt-1 / PlGF = помощ за диагнозата
Определяне нивата на sFlt-1 и PlGF е първоначална стъпка в диагностиката на прееклампсия.
Проведените клинични проучвания доказват, че съотношението sFlt-1 / PlGF превъзхожда изполването на единичните маркери и е по-добър предиктор за риск от развитие на заболяването.
Препоръките за употреба на Elecsys sFlt-1 и Elecsys PlGF са за едновременно изследване на нивата им и определяне на съотношението sFlt-1 / PlGF за дианостициране на пациента.
Оптимална cut-off стойност на sFlt-1/PlGF:
- Направени са няколко проучвания за cut-off стойностите за съотношението sFlt-1/PlGF, за да се открие граница с достатъчна чувствителност и специфичност за оценка на прееклампсия
- Verlohren и колеги изследват автоматизиран тест за sFlt-1 и PlGF и проучват стойността на съотношението sFlt-1/PlGF при оценката на прееклампсия
- Включени са 351 пациенти: 71 с прееклампсия и 280 контроли на съответната гестационна възраст
- Сut-off стойност за съотношението sFlt-1/PlGF от 85 дава най-високата чувствителност (82 %) и специфичност (95 %)
Диагностична стойност на sFlt-1/PlGF:
- оценка на риска при бременни, склонни към развитие на ПЕ
- потвърждение/изключване ПЕ при жени с "признаци и симптоми на ПЕ" или при неясни клинични ситуации
- мониторинг и краткосрочна прогноза на ПЕ
Надяваме се, че автоматизираните тестове на на Roche Diagnostics Elecsys sFlt-1 и Elecsys PlGF, ще подпомогнат ефективно диагностиката на ПЕ за подобряване грижите за здравето на майката и плода по време на бременност.